3M菌落總數測試片

1.操作方法

①未開封時，置於≤8℃冷藏，注意外包裝上的保存期限，打開包裝時，應在室溫條件下。已開封的，應用壓條或膠帶封口後，置於室溫，一個月內用完。

②稱取樣品置於無菌均質袋或均質杯中，加入無菌稀釋液攪拌或均質樣品，並用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調pH至6.5~7.2。

注意:無菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩衝液，這些稀釋液會抑製細菌的生長。

③將測試片置於平坦表麵處，保持水平，揭開上層膜，移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測試片的正中央。然後將上層膜慢慢落下，盡量不要出現氣泡，切勿向下滾動上層膜。

④將壓板的圓形內凹麵朝下，放置在上層膜的正中央，然後輕輕壓下，使樣液均勻覆蓋於圓形的培養基麵積上，切不可扭轉壓板。

⑤拿起壓板，靜置1min以上等待培養基凝固。然後測試片的透明麵朝上，多可疊放20片，置於36℃培養48小時，並保持培養箱的濕度。

2.判讀方法

①菌落總數測試片內，含有一種紅色指示染劑，可以使菌落呈現紅色便於計數，計算所有紅色菌落，不論大小及顏色深淺。

②3M檢測片菌落計數的適宜計數範圍是25~250。

③測試片的計數麵積約為20cm2。每一個黃色方框的麵積是1cm2。當菌落總數超過250個時，為了估計菌落數，可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)。計算平均菌落數，然後再乘以20可得到測試片上的菌落數。

④當測試片上的菌落太多而無法進行計數時，記錄為“TNTC”。

⑤有很數量的菌落，使整個生長區域變成粉色，或僅僅在生長邊緣區域觀察到單個菌落，記錄為“TNTC”。

⑥有很的菌落數量，並且有時菌落會出現分布不均勻的情況，記錄為“TNTC”。

⑦可以看到直徑較大的菌落，並且可以計數，但是仔細觀察時，會發現非常密集非常細小的菌落分布在計數區域內，此時記錄為“TNTC”。

⑧很少數量的菌種，會將測試片上的培養基液化，在計數區域內出現一個粉紅色的液化區，此時不要記錄液化區內的紅點,應選擇沒有被液化區域內的菌落進行計數，選取沒有液化部分的幾個有代表性的小方格(1cm2)。計算平均菌落數，然後乘以20。得到結果。

⑨注意和樣品殘渣顆粒進行區。有些樣品中會含有一些紅色的殘渣顆粒，菌落應該是紅色規則的圓形，而顆粒的形狀是不規則的。如果樣品以紅色顆粒為主(比如辣椒粉)，這類樣品的菌落總數檢測，不宜采用3M菌落總數測試片。